Izvedba bioloških testov s kombinacijo EryA/PlyB na parodontalnih bakterijah bi prikazala realni potencial omenjene kombinacije v zdravljenju parodontalne bolezni.

Slika 17, narejena na osnovi zgoraj prikazanih kinetičnih grafov, prikazuje delež sproščenega kalceina v odvisnosti od skupne koncentracije EryA/PlyB po 60 minutah.

Zaradi omenjenih dejstev bi se lahko lastnost kompleksa EryA/PlyB uporabila za selektivno zatiranje organizmov, katerih celične membrane vsebujejo molekularno tarčo CPE.

Posledično smo želeli pridobiti kompleks, ki ima višjo citolitično aktivnost, kot EryA/PlyB (opisano v poglavjih 4.6 in 4.7).

Posledično, bi lahko pridobili kompleks, ki ima višjo citolitično aktivnost kot EryA/PlyB.

EryA-mCherry ter mešanico proteinov EryA/PlyB za ugotavljanje potenciala njene porotvorne aktivnosti.

Relevantno sproščanje kalceina iz teh liposomov je opazno vse do razmerja koncentracij EryA/PlyB = 0,3/0,144 μg/ml.

Slika 17: Grafični prikaz deleža sproščenega kalceina v odvisnosti od koncentracije c EryA/PlyB iz malih unilamelarnih liposomov s kalcinom.

Kljub 5-krat višji koncentraciji EryA/PlyB nismo zaznali por v velikem številu.

Dokazali smo tudi, da pride do nastanka por EryA/PlyB, čeprav PlyB ni naravni proteinski partner EryA.

Pore EryA/PlyB smo uspeli vizualizirati pri 5-krat višji koncentraciji EryA, saj ima ta egerolizin slabšo afiniteto do lipidnih membran (Slika 28B).

Vpliv različnih koncentracij proteinskih mešanic EryA/PlyB in EryA/EryB na čas polovične lize govejih eritrocitov.

Proteinski kompleks EryA/PlyB ima slabšo permeabilizacijsko aktivnost, saj se po 30 min pri najvišjih koncentracijah sprosti le ~20 % kalceina (Slika 26A,B).

Kompleksi OlyA6/PlyB, PlyA2/PlyB in EryA/PlyB delujejo na specifični membranski lipidni receptor, in ne na proteinske receptorje, podvržene mutacijam.

Posledično bi povečali citolitičnost kompleksa EryA/PlyB, ki je manj učinkovita v primerjavi z ostalimi kompleksi (OlyA6/PlyB in PlyA2/PlyB).

Ugotovili smo, da so kompleksi OlyA6/PlyB, PlyA2/PlyB in EryA/PlyB selektivno toksični za ličnike koruznega in ličinke koloradskega hrošča.

Prikaz por OlyA6/PlyB in EryA/PlyB na velikih unilamelarnih veziklih, ki vsebujejo CPE s krioelektronsko mikroskopijo.

Slika 58 Vpliv različnih koncentracij proteinskih mešanic EryA/PlyB in EryA/EryB na čas polovične lize govejih eritrocitov.

Rezultati SPR prikazujejo ireverzibilno vezavo EryA in EryA/PlyB z membranami, ki imajo vsaj 5 molskih% CPE.

Kompleks EryA/PlyB je imel šibek učinek na L3+L4 ličinke koloradskega hrošča.